Co léčí ořechové listy?
1. Kochetkov N.K. Chemie biologicky aktivních sloučenin / N.K. Kočetkov. – M., 1970. – 631 s.
2. Ovodov Yu.S. Moderní představy o pektinových látkách / Yu.S. Ovodov // Bioorgan, chemie. – 2009. – T. 35, č. 3. – S. 293-310.
3. Polysacharidy Fabaceae V. β-glukan z kořenů Sophora flavescens KOŘENY / D.N. Olennikov [et al.] // Chemie přírodních sloučenin. – 2011. – č. 1. – S. 47.
Léky vyrobené z rostlinných materiálů mají nízkou toxicitu a vysokou biologickou aktivitu a jsou široce používány v domácí farmaceutické praxi, jejíž sortiment tvoří asi 40 % z celkového počtu používaných léků. Mezi tyto objekty patří ořešák vlašský (Juglans regia L.) z čeledi vlašské (Juglandaceae). Listové mladé výhonky s květy ořešáku jsou široce používány v lidovém i oficiálním lékařství v zahraničí jako protizánětlivé, hojivé a antimikrobiální činidlo. Ořešák má širokou pěstitelskou oblast.
Obstarávání surovin je nákladově efektivní a pracně náročný proces. Proces izolace pektinu je prostý technologické náročnosti. Pektin má aktivní komplexotvornou schopnost s ohledem na radioaktivní kobalt, stroncium, cesium, zirkonium, ruthenium, yttrium a další kovy. Během procesu trávení se pektin mění na kyselinu pektinovou, která se spojuje s těžkými kovy a radionuklidy a tvoří nerozpustné soli, které jsou přirozeně vylučovány z těla. Při jeho neustálém užívání nedochází k hromadění škodlivých látek v těle [1, 3]. Kombinace široké škály farmakologických vlastností, stejně jako absence toxických účinků na organismus, otevírá široké možnosti využití pektinového komplexu izolovaného z listů ořechu.
Účelem této práce bylo izolovat polysacharidový komplex z listů ořešáku a identifikovat jeho monosacharidové složení.
Předmětem studie byly listy ořešáku sesbírané v červenci až srpnu 2014. Suroviny byly sušeny ve stínu, rozdrceny a prosévány přes síto o průměru otvoru 5 mm.
Izolace polysacharidů do frakcí: I – WPPS (vodou rozpustné polysacharidy), II – PV (pektinové látky), III – Hz A (hemicelulóza A) a IV – Hz B (hemicelulóza B) z listů ořešáku byla provedena podle metoda N.K. Kochetková a M. Sinnera [1].
Izolace VPPS: surovina byla extrahována vodou při teplotě místnosti a za stálého míchání po dobu 24 hodin (poměr suroviny k extrakčnímu činidlu je 1:15). Výsledný extrakt byl zfiltrován a polysacharidy z filtrátu byly vysráženy dvojnásobným objemem 95% ethylalkoholu. Směs vody a alkoholu byla poté odstřeďována po dobu 15 minut při rychlosti otáčení 3000 ot./min. Sraženina byla kvantitativně přenesena do odpařovací misky a vysušena v exsikátoru do konstantní hmotnosti.
Izolace PV: zbývající moučka po izolaci VPPS byla extrahována ve vodní lázni při 100 °C a za stálého míchání po dobu jedné hodiny směsí 0,5% roztoku šťavelanu amonného a 0,5% roztoku kyseliny šťavelové (1:1). Dále byl extrakt zfiltrován přes několik vrstev gázy a byl přidán jeden objem 95% ethylalkoholu pro vysrážení PV. Sraženina byla oddělena centrifugací za stejných podmínek a sraženina byla vysušena v exsikátoru.
Izolace Hz A: jídlo zbývající po izolaci PV bylo ošetřeno 7% roztokem hydroxidu sodného po dobu 17 hodin. Extrakt byl zfiltrován přes několik vrstev gázy a upraven na pH 6-7 pomocí ledové kyseliny octové, vytvořila se sraženina, Hz A. Dále byla odstředěna a sraženina byla přenesena do odpařovací misky a vysušena do konstantní hmotnosti.
Izolace Hz B: supernatant po izolaci Hz A byl dialyzován přes semipermeabilní membránu proti vodě po dobu 18 hodin. Zbývající kapalina byla převedena do baňky s plochým dnem a ošetřena dvojnásobným objemem 95% ethylalkoholu. Oddělená sraženina Hz B byla oddělena odstředěním jak je popsáno výše a vysušena do konstantní hmotnosti [2].
Pro stanovení monosacharidového složení izolovaných frakcí byla provedena hydrolýza 2N kyselinou sírovou při 100 °C po dobu 10 hodin pro ve vodě rozpustné polysacharidy a po dobu 48 hodin pro zbývající polysacharidové komplexy. Hydrolyzát byl neutralizován uhličitanem barnatým za použití univerzálního indikátoru do neutrální reakce, zfiltrován, odpařen ve vodní lázni na malý zbytek a chromatografován. Monosacharidy po kyselé hydrolýze byly identifikovány vzestupnou papírovou chromatografií porovnáním se spolehlivými svědeckými vzorky. Chromatogramy byly vysušeny na vzduchu a ošetřeny anilinftalátovým činidlem, následovalo zahřívání v sušárně při teplotě 100-110 °C po dobu 15-20 minut. Na chromatogramu byl pozorován výskyt monosacharidových skvrn různých barev [1, 2]. Souhrnná data týkající se polysacharidového komplexu jsou uvedena v tabulce.
Kvalitativní a kvantitativní složení polysacharidů z listů vlašského ořechu (Juglans regia)
Zjištěné monosacharidy po hydrolýze